Pengembangan Metode Analisis Penetapan Kadar Asesulfam-K dan Aspartam menggunakan KCKT Detektor Photo Dioda Array

Asesulfam-K dan aspartam adalah pemanis buatan yang paling sering ditambahkan pada pangan olahan khususnya pada minuman instan. Asesulfam-K memiliki tingkat kemanisan 200 kali, sedangkan aspartam memiliki tingkat kemanisan relatif sebesar 60 - 220 kali lebih manis daripada gula. Metode analisis terkait penetapan kadar pemanis buatan yang Asesulfam-K yang saat ini rutin digunakan oleh Badan POM merupakan metode tunggal menggunakan instrument Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) menggunakan detektor UV. Detektor UV kurang selektif dibandingkan dengan detektor PDA yang lebih selektif sehingga menghindari terjadinya false positive dan penetapan kadar yang tidak tepat. Penelitian ini dilakukan pengembangan metode analisis Asesulfam-K dan aspartam dalam pangan olahan sediaan sirup, dan dilanjutkan dengan validasi metode hasil pengembangan metode. Penelitian ini menggunakan metode eksperimental yang dilakukan didalam laboratorium, variabel bebas merupakan optimasi yang dilakukan terhadap detektor, panjang kolom, konsentrasi campuran fase gerak, laju alir, volume injeksi, panjang kolom dan suhu kolom sedangkan variabel tergantung merupakan waktu retensi, faktor ikutan, standar deviasi, resolusi, luas area dan parameter lain yang sesuai. Kondisi paling optimal kemudian dilakukan validasi metode menggunakan parameter ICH untuk penetapan kadar yaitu spesifisitas, linieritas, akurasi, presisi, Limit of Detection (LOD) dan Limit of Quantification (LOQ). Metode ini menawarkan keuntungan dapat melakukan penetapan kadar dua bahan tambahan pangan pemanis buatan Asesulfam-K dan aspartam dengan waktu uji yang singkat 11 menit untuk pemisahan dua bahan tambahan pangan yang terkait secara struktural pada kolom C18 dengan panjang 15 cm dengan fase gerak yang terdiri dari buffer fosfat (pH 4,3) dan asetonitril. Pemisahan penuh dua bahan tambahan pangan dicapai (Rs > 1,5) dengan menerapkan komposisi fase gerak 90% dan 10%, suhu kolom 45 °C, volume injeksi 20 μL dan laju alir 1,2 ml/menit. Hasil dari validasi metode membuktikan spesifitas, linearitas, akurasi, presisi dan Limit of Quantitation yang memuaskan; oleh karena itu, kami menyimpulkan bahwa metode ini cocok untuk kuantifikasi rutin dua bahan tambahan pangan dalam sirup yang tersedia di pasaran.