TRANSFORMASI GENETIK TANAMAN ANGGREK DENDROBIUM PADA BEBERAPA TINGKAT RAPAT OPTIS Agrobacterium tumefaciens

wajayanti, Selva (2006) TRANSFORMASI GENETIK TANAMAN ANGGREK DENDROBIUM PADA BEBERAPA TINGKAT RAPAT OPTIS Agrobacterium tumefaciens. Other thesis, University of Muhammadiyah Malang.

[img]
Preview
Text
TRANSFORMASI_GENETIK_TANAMAN.pdf

Download (153kB) | Preview

Abstract

Manipulasi gen yang semula dilakukan secara acak, dapat diarahkan pada target yang lebih tepat dengan teknik transformasi genetik. Transformasi genetik dengan menyisipkan gen ke dalam genom tanaman dengan menggunakan Agrobacterium tumefaciens sebagai vektor (perantara) dapat dilakukan pada tanaman anggrek Dendrobium sp. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan efisiensi transformasi genetik anggrek Dendrobium pada beberapa tingkat rapat optis A.tumefaciens. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi Universitas Muhammadiyah Malang. Bakteri yang digunakan adalah A.tumefaciens galur EHA105 (pCAMBIA1303), yang mempunyai gen penanda terhadap enzim -glucuronidase (GUS). PLB (Plant Likes Bodies) anggrek Dendrobium dikokultivasi 2 malam tanpa cahaya pada medium VW modifikasi Linn 1986 dengan tambahan 100 μM acetosyringone. PLB dipindahkan pada medium antibiotik I (VW + 250 mg/l Cefotaxime) selama 15 hari. PLB resisten medium antibiotik I disubkultur pada media antibiotik II (VW + 100 mg/l Cefotaxime) selama 15 hari. PLB resisten medium antibiotik II disubkultur kembali ke media regenerasi dan sebagian PLB digunakan untuk uji GUS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa daya regenerasi PLB tertransformasi mampu mendapatkan 69,97% PLB bertunas pada Optical Density (OD) 0,2 – 0,4 dan 11,71% tunas PLB yang berdaun pada OD 0,6 – 0,8. Optical Density (OD) 0,4 – 0,6 merupakan rapat optis optimum pada transformasi genetik tanaman anggrek Dendrobium yang menghasilkan efisiensi transformasi 20,45%. Hasil pengujian histokimia gen GUS menunjukkan bahwa PLB anggrek Dendrobium cukup peka terhadap infeksi Agrobacterium pada beberapa tingkat Optical Density (OD). Hal ini ditunjukkan dengan adanya respon positif terhadap infeksi A.tumefaciens EHA105 (pCAMBIA1303) yang berupa noda biru pada PLB transformasi setelah direaksikan dengan substrat X-glu.

Item Type: Thesis (Other)
Subjects: S Agriculture > SB Plant culture
Divisions: Faculty of Agriculture & Animal Husbandry > Department of Agronomy
Depositing User: Zainul Afandi
Date Deposited: 04 Jul 2012 07:01
Last Modified: 04 Jul 2012 07:01
URI: http://eprints.umm.ac.id/id/eprint/10986

Actions (login required)

View Item View Item